毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序標(biāo)準(zhǔn)：

本程序包括四個(gè)階段，即急性毒性試驗(yàn)，蓄積毒性和致突變?cè)囼?yàn)，亞慢性毒性（包括繁殖、致畸）試驗(yàn)和代謝試驗(yàn)，慢性毒性（包括致癌）試驗(yàn)。

凡屬我國創(chuàng)制的新化學(xué)物質(zhì)，一般要求進(jìn)行四個(gè)階段的試驗(yàn)。特別是對(duì)其中化學(xué)結(jié)構(gòu)提示有慢性毒性或致癌作用可能者，產(chǎn)量大、使用面積廣、攝入機(jī)會(huì)多者，必需進(jìn)行全部四個(gè)階段的試驗(yàn)。同時(shí)，在進(jìn)行急性毒性、90天喂養(yǎng)試驗(yàn)和慢性毒性（包括致癌）試驗(yàn)時(shí)，要求用兩種動(dòng)物。

凡屬與已知物質(zhì)（指經(jīng)過安全性評(píng)價(jià)并允許使用者）的化學(xué)結(jié)構(gòu)基本相同的衍生物，則可根據(jù)第一、二、三階段試驗(yàn)的結(jié)果，由有關(guān)專家進(jìn)行評(píng)議，決定是否需要進(jìn)行第四階段試驗(yàn)。

凡屬我國仿制的而又具有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，如多數(shù)國家已允許使用于食品，并有安全性證據(jù)，或世界衛(wèi)生組織已公布每人每日允許攝入量（即ADI，以下簡稱日許量）者，同時(shí)生產(chǎn)單位又能證明我國產(chǎn)品的理化性質(zhì)、純度和雜質(zhì)成份及含量均與國外產(chǎn)品一致，則可以先進(jìn)行第一、二階段試驗(yàn)。如試驗(yàn)結(jié)果與國外相同產(chǎn)品一致，一般不再繼續(xù)進(jìn)行試驗(yàn)，可進(jìn)行評(píng)價(jià)。如評(píng)價(jià)結(jié)果允許用于食品，則制定日許量。凡在產(chǎn)品質(zhì)量或試驗(yàn)結(jié)果方面與國外資料或產(chǎn)品不一致，則應(yīng)進(jìn)行第三階段試驗(yàn)。

第一階段：急性毒性試驗(yàn)

目的：

一、了解受試物的毒性強(qiáng)度和性質(zhì)；

二、為蓄積性和亞慢性試驗(yàn)的劑量選擇提供依據(jù)。

試驗(yàn)項(xiàng)目：

1.用霍恩氏法、機(jī)率單位法或寇氏法，測定經(jīng)口半數(shù)致死量（LD50）。如劑量達(dá)10克/公斤體重仍不引起動(dòng)物死亡，則不必測定半數(shù)致死量。

2.必要時(shí)進(jìn)行七天喂養(yǎng)試驗(yàn)。以上兩個(gè)項(xiàng)目均分別用兩種性別的小鼠或大鼠。

結(jié)果判定：

1.如LD50或七天喂養(yǎng)試驗(yàn)的最小有作用劑量小于人的可能攝入量的10倍者，則放棄，不再繼續(xù)試驗(yàn)。

2.如大于10倍者，可進(jìn)入下一階段試驗(yàn)。為慎重起見，凡LD50在10倍左右時(shí)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集|整理 應(yīng)進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，或用另一種方法進(jìn)行驗(yàn)證。

第二階段：蓄積毒性和致突變?cè)囼?yàn)

蓄積毒性試驗(yàn)（凡急性毒性試驗(yàn)LD50大于10克/公斤體重者，則可不進(jìn)行蓄積毒性試驗(yàn)）：

目的：了解受試物在體內(nèi)的蓄積情況。

試驗(yàn)項(xiàng)目：

1.蓄積系數(shù)法。用兩種性別的大鼠或小鼠，各20只。

2.二十天試驗(yàn)法。用兩種性別的大鼠或小鼠，每個(gè)劑量組雌雄各10只。以上兩種方法任選一種。

結(jié)果判定：

1.蓄積系數(shù)（K）小于3，為強(qiáng)蓄積性；蓄積系數(shù)大于或等于3，為弱蓄積性。

2.如1/20LD50組有死亡，且有劑量——反應(yīng)關(guān)系，則為強(qiáng)蓄積性；僅1/20LD50組有死亡，則為弱蓄積性。

致突變?cè)囼?yàn)：

目的：對(duì)受試物是否具有致癌作用的可能性進(jìn)行篩選。

試驗(yàn)項(xiàng)目分為以下四類：

1.細(xì)菌致突變?cè)囼?yàn)：Ames試驗(yàn)或大腸桿菌試驗(yàn)醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集|整理。

2.微核試驗(yàn)和骨髓細(xì)胞染色體畸變分析試驗(yàn)中任選一項(xiàng)。

3.顯性致死試驗(yàn)：睪丸生殖細(xì)胞染色體畸變分析試驗(yàn)和精子畸形試驗(yàn)中任選一項(xiàng)。

4.DNA修復(fù)合成試驗(yàn)。

根據(jù)受試物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)以及對(duì)遺傳物質(zhì)作用終點(diǎn)的不同，并兼顧體外的體內(nèi)試驗(yàn)以及體細(xì)胞和生殖細(xì)胞的原則，在以上四類中選擇三項(xiàng)試驗(yàn)。

結(jié)果判定：

1.如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陽性，則無論蓄積毒性如何，均表示受試物很可能具有致癌作用，一般應(yīng)予以放棄。

2.如其中兩項(xiàng)試驗(yàn)為陽性，而又有強(qiáng)蓄積性，則一般應(yīng)予以放棄；如為弱蓄積性，則由有關(guān)專家進(jìn)行評(píng)議，根據(jù)受試物的重要性和可能攝入量等，綜合權(quán)衡利弊再作出決定。

3.如其中一項(xiàng)試驗(yàn)為陽性，則再選擇二項(xiàng)其他致突變?cè)囼?yàn)（包括枯草桿菌試驗(yàn)、體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞染色體畸變分析、果蠅隱性致死試驗(yàn)、DNA合成抑制試驗(yàn)和姐妹染色單體互換試驗(yàn)等）。如此兩項(xiàng)均為陽性，則無論蓄積毒性如何，均應(yīng)予以放棄；如有一項(xiàng)為陽性，而為弱蓄積性，則可進(jìn)入第三階段試驗(yàn)。

4.如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則無論蓄積毒性如何，均可進(jìn)入第三階段試驗(yàn)。

第三階段：亞慢性毒性和代謝試驗(yàn)

亞慢性毒性試驗(yàn)

目的：

1.觀察受試物以下同劑量水平較長期喂養(yǎng)對(duì)動(dòng)物的毒性作用性質(zhì)和靶器官，并確定最大無作用劑量。

2.了解受試物對(duì)動(dòng)物繁殖及對(duì)子代的致畸作用。

3.為慢性毒性和致癌試驗(yàn)的劑量選擇提供依據(jù)。

4.為評(píng)價(jià)受試物能否應(yīng)用于食品提供依據(jù)。

試驗(yàn)項(xiàng)目：

1.90天喂養(yǎng)試驗(yàn)。

2.喂養(yǎng)繁殖試驗(yàn)。

3.喂養(yǎng)致畸試驗(yàn)。

4.傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。

前三項(xiàng)試驗(yàn)可用同一批動(dòng)物（一般用兩種性別的大鼠。傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)用兩種性別的大鼠和/或小鼠）進(jìn)行。關(guān)于喂養(yǎng)致畸和傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)的選擇，可根據(jù)受試物的性質(zhì)而定。任何一種致畸試驗(yàn)的結(jié)果已能作出明確評(píng)價(jià)時(shí)，不要求作另一種致畸試驗(yàn)。但在結(jié)果不足以作出評(píng)價(jià)時(shí)，或有關(guān)專家共同評(píng)議后認(rèn)為需要時(shí)，再進(jìn)行另一種致畸試驗(yàn)。

結(jié)果判定：如以上試驗(yàn)中任何一項(xiàng)的最敏感指標(biāo)的最大無作用劑量（以毫克/公斤體重計(jì)）：

1.小于或等于人的可能攝入量的100倍者，表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)予以放棄。

2.大于100倍而小于300倍者，可進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)。

3.大于或等于300倍者，則不必進(jìn)行慢性試驗(yàn)，可進(jìn)行評(píng)價(jià)。

代謝試驗(yàn)

目的：

1.了解在體內(nèi)的吸收、分布和排泄速度以及蓄積性。

2.尋找可能的靶器官。

3.為選擇慢性毒性試驗(yàn)的合適動(dòng)物種系提供依據(jù)。

4.了解有無毒性代謝產(chǎn)物的形成。

試驗(yàn)項(xiàng)目：對(duì)于我國創(chuàng)制的化學(xué)物質(zhì)或是與已知物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)基本相同的衍生物，至少應(yīng)進(jìn)行以下幾項(xiàng)試驗(yàn)：

1.胃腸道吸收。

2.測定血濃度，計(jì)算生物半減期和其他動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。

3.主要器官和組織中的分布。

4.排泄（尿、糞、膽汁）。有條件時(shí)可進(jìn)一步進(jìn)行代謝產(chǎn)物的分離和鑒定。

對(duì)于世界衛(wèi)生組織等國際機(jī)構(gòu)已認(rèn)可或兩個(gè)及兩個(gè)以上經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國家已允許使用的以及代謝試驗(yàn)資料比較齊全的物質(zhì)，暫不要求進(jìn)行代謝試驗(yàn)。對(duì)于屬于人體正常成份的物質(zhì)可不進(jìn)行代謝試驗(yàn)。

第四階段：慢性毒性（包括致癌）試驗(yàn)

目的：

1.發(fā)現(xiàn)只有長期接觸受試物后才出現(xiàn)的毒性作用，尤其是進(jìn)行性或不可逆的毒性作用以及致癌作用。

2.確定最大無作用劑量，對(duì)最終評(píng)價(jià)受試物能否應(yīng)用于食品提供依據(jù)。

試驗(yàn)項(xiàng)目：可將兩年慢性毒性試驗(yàn)和致癌試驗(yàn)結(jié)合在一個(gè)動(dòng)物試驗(yàn)中進(jìn)行。用兩種性別的大鼠或小鼠。

結(jié)果判定：如慢性毒性試驗(yàn)所得的最大無作用劑量（以毫克/公斤體重計(jì)）：

1.小于或等于人的可能攝入量的50倍者，表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)予放棄。

2.大于50倍而小于100倍者，需由有關(guān)專家共同評(píng)議。

3.大于或等于100倍者，則可考慮允許使用于食品，并制定日許量。如在任何一個(gè)劑量發(fā)現(xiàn)有致癌作用，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，則需由有關(guān)專家共同評(píng)議，以作出評(píng)價(jià)。

本程序（試行）內(nèi)未作具體規(guī)定者，凡屬地方產(chǎn)品，由省、自治區(qū)、直轄市食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)征求有關(guān)專家意見，確定試驗(yàn)方案；凡屬全國范圍內(nèi)銷售的產(chǎn)品，則由省、自治區(qū)、直轄市食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)提出試驗(yàn)方案后，報(bào)衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所審定。

各地按本程序（試行）進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)的單位需由當(dāng)?shù)厥?、市、自治區(qū)食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)提名，報(bào)請(qǐng)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門認(rèn)可，并報(bào)衛(wèi)生部衛(wèi)生防疫司及衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所備案。