1.【問題】不完全抗體指的是?
【解答】不完全抗體也指免疫性抗體,主要由母嬰血型不合的妊娠及血型不合的輸血產(chǎn)生,以IgG為主,即在鹽水介質(zhì)中不能與含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)。
【解答】免疫印跡法是在蛋白質(zhì)電泳分離和抗原抗體檢測的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項檢測蛋白質(zhì)的技術(shù),它將SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應(yīng)的高特異性相結(jié)合。
第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)??乖鹊鞍讟悠方?jīng)SDS處理后帶負(fù)電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快。此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區(qū)帶)。
第二階段為電轉(zhuǎn)移。此階段分離的蛋白質(zhì)條帶肉眼仍不可見。
第三階段為酶免疫定位。將印有蛋白質(zhì)條帶的硝酸纖維素膜(相當(dāng)于包被了抗原的固相載體)依次與特異性抗體和酶標(biāo)第二抗體作用后,加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物,使區(qū)帶染色。常用的HRP底物為3,3-二氨基聯(lián)苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈藍(lán)紫色)。陽性反應(yīng)的條帶清晰可辨。并可根據(jù)SDS-PAGE時加入的分子量標(biāo)準(zhǔn),確定各組分的分子量。
4.【問題】精子總數(shù)的計數(shù)公式是什么?精子畸形的總數(shù)怎么算?
【解答】精確計數(shù)法:①血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法:只能用于精子數(shù)量觀察,不能同時進行精子活動率和活動度、運動軌跡和速度等的檢查等。②Makler精子計數(shù)板計數(shù)法:簡便、快速,精液不需要稀釋,一次加樣不但可計數(shù)精子密度,還可分析精子的活動力和活動率。③計算機輔助精液分析(CASA):CASA系統(tǒng)是利用圖像和計算機視屏技術(shù)來進行精子計數(shù),利用CASA計數(shù)精子簡單、快速,但易受精液中細(xì)胞成分和非精子顆粒物質(zhì)的影響。
血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法:與血小板計數(shù)方法一樣,計數(shù)精子個數(shù)時要以精子的頭部為準(zhǔn)。
精子濃度=5個中方格內(nèi)精子總數(shù)×20×5×10×106
精子總數(shù)=精子濃度×精子量
精子畸形檢查一般用染色法:經(jīng)精液制成薄片,干燥與固定后進行改良巴氏染色(也可以用吉姆薩染色)。油鏡下觀察計數(shù)200個精子,報告異常精子的百分率。
檢驗技師:《答疑周刊》2017年第10期(word版本下載)
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