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弓形蟲病免疫學(xué)檢查;
1.檢測抗體;所用抗原主要有速殖子可溶性抗原(胞質(zhì)抗原)和胞膜抗原。前者的抗體出現(xiàn)較早(用染色試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)檢測)、而后者的抗體出現(xiàn)較晚(用間接血凝試驗(yàn)等檢測)。同時采用多種方法檢測可起互補(bǔ)作用而提高檢出率。由于弓形蟲在人體細(xì)胞內(nèi)可長期存在,故檢測抗體一般難以區(qū)別現(xiàn)癥感染或以往感染,可根據(jù)抗體滴度的高低以及其動力學(xué)變化加以判斷。常用的檢測方法有:
⑴染色試驗(yàn)(Sabin-FeldmanDT);檢測IgG抗體。感染后1~2周出現(xiàn)陽性,3~5周抗體效價達(dá)高峰,以后逐漸下降,可維持多年。抗體效價1∶陽性提示為隱性感染;1∶256為活動性感染1∶1024為急性感染。其缺點(diǎn)為需要活蟲進(jìn)行操作。
⑵間接熒光抗體試驗(yàn)(IFAT);檢測IgM和IgG抗體。具靈敏、特異、快速、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),與DT基本一致。但如有類風(fēng)濕因子、抗核抗體陽性時,可引起假陽性反應(yīng)。血清抗體效價1∶64為既往感染,余同DT。
⑶間接血凝試驗(yàn)(IHA);試驗(yàn)方法簡便醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。與DT結(jié)果符合率高。但一般在病后一個月左右出現(xiàn)陽性。結(jié)果判斷同IFAT。重復(fù)性差和致敏紅細(xì)胞不穩(wěn)定與其缺點(diǎn)。
⑷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA);可檢查IgM與IgG抗體。并有靈每度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。也可用于抗原鑒定。近年來在ELISA的基礎(chǔ)上又創(chuàng)建、衍生了多種新新的測定方法,如金葡萄A蛋白(SPA)-ELISA;辣根過氧化物酶標(biāo)記SPA取代酶標(biāo)第二抗體進(jìn)行ELISA檢測(PPA-ELISA);親和素-生物素(ABG)ELISA;凝膠擴(kuò)散(DIG)-ELISA;斑點(diǎn)(DDT)-ELISA以及單克隆抗體(McAb)-ELISA等更靈敏、更特異的方法。
⑸放射免疫試驗(yàn)(RIA);具有高度敏感性和特異性。
2.檢測抗原;用免疫學(xué)方法檢測宿主細(xì)胞內(nèi)的病原(速殖子或包囊)、在血清及體液中的代謝或裂解產(chǎn)物(循環(huán)抗原)。是早期診斷和確診的可靠方法。國內(nèi)外學(xué)者建立了McAb-ELISA以及McAb與多抗的夾心型ELISA法檢測急性患者血清循環(huán)抗原,其敏感度為能檢出血清中0.4μg/ml的抗原。
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