早期的電泳技術(shù)是由瑞典Uppsala大學(xué)物理化學(xué)系Svedberg教授提出了荷電的膠體顆粒在電場(chǎng)中移動(dòng)的現(xiàn)象稱其為電泳。于1937年，收ArneTiselius教授——諾貝爾獎(jiǎng)金獲得者，利用些電泳現(xiàn)象，發(fā)明了最早期的界面電泳，用于蛋白質(zhì)分離的研究，開(kāi)創(chuàng)了電滬泳技術(shù)的新紀(jì)元。此后，各種電泳技術(shù)及儀器相繼問(wèn)世，先進(jìn)的電泳儀和電泳技術(shù)的不斷發(fā)展，使它在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中占重要地位，按電泳的原理有三種形式的電泳分離系統(tǒng)：原則上按電泳的原理來(lái)分，即移動(dòng)界面電泳、區(qū)帶電泳和穩(wěn)態(tài)電泳或稱置換（排代）電泳。在自由移動(dòng)界面電泳，是帶電分子的移動(dòng)速率通過(guò)觀察界面的移動(dòng)來(lái)測(cè)定，該方法已成為歷史。代之以采用支持介質(zhì)的區(qū)帶電泳。

　　區(qū)帶電泳因所用支持體的種類(lèi)、粒度大小和電泳方式等不同，其臨床應(yīng)用的價(jià)值也各有差異。固體支持介質(zhì)可分為兩類(lèi)：一類(lèi)是濾紙、醋酸纖維素薄膜、硅膠、礬土、纖維素等；另一類(lèi)是淀粉、瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠。由于它們具微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故除能產(chǎn)生電泳作用外，還有分子篩效應(yīng)，小分子會(huì)比大分子跑得快而使分辨率提高。它的最大優(yōu)點(diǎn)是幾乎不吸附蛋白質(zhì)，因此電泳無(wú)拖尾的現(xiàn)象。低濃度的瓊脂糖電泳相當(dāng)于自由界面電泳，蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中可自由穿透，陰力小，分離清晰，透明度高，能透過(guò)200～7000nm波長(zhǎng)的著色區(qū)帶的檢測(cè)敏感性，為此第一類(lèi)支持介質(zhì)現(xiàn)已被第二類(lèi)支持介質(zhì)所替代。

　　穩(wěn)太電泳或稱置換電泳的特點(diǎn)是分子顆粒的電泳遷移在一定時(shí)間后達(dá)到穩(wěn)態(tài)，如等電聚焦和等速電泳。

　　區(qū)帶電泳是臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域中應(yīng)用最廣泛的技術(shù)，有重要臨床意義，尤其是其他新技術(shù)，更擴(kuò)大了其應(yīng)用范圍，提高了檢測(cè)技術(shù)，現(xiàn)對(duì)該技術(shù)的現(xiàn)狀與發(fā)展作一評(píng)述。

　　一、正確解釋電泳結(jié)果，有助于臨床疾病判斷的參考

　　新鮮血清經(jīng)電泳后可精確地描繪出患者蛋白質(zhì)的全貌，一般常見(jiàn)的是白蛋白降低、某個(gè)球蛋白區(qū)域升高，提示不同的臨床意義。如急性炎癥時(shí)，可見(jiàn)a1，a2區(qū)百分率升高；腎病綜合征、慢性腎小球腎炎時(shí)呈現(xiàn)白蛋白下降，a2球蛋白升高，β球蛋白也升高；缺鐵性貧血時(shí)可由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的升高而呈現(xiàn)β區(qū)帶增高，醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理而慢性肝病或肝硬變呈現(xiàn)白蛋白顯著降低，r球蛋白升高2-3倍，示免疫球蛋白多克隆增高，甚至可見(jiàn)β-r融合的橋連現(xiàn)象，還可在r區(qū)呈現(xiàn)細(xì)而密的寡克隆區(qū)帶；對(duì)單一克隆漿細(xì)胞異常增殖所產(chǎn)生的無(wú)抗體活性均一的免疫球蛋白稱M蛋白的檢測(cè)，血清蛋白電泳是其首選的實(shí)驗(yàn)診斷方法?？稍陔娪緟^(qū)帶的a2-r區(qū)呈現(xiàn)致密而深染，高度集中的蛋白克隆增生區(qū)帶，稱其為m蛋白區(qū)帶，掃描后形成高而狹窄的單株峰，若些峰在r區(qū)其峰高與峰底寬之比>2：1，而由于正常免疫球蛋白合成限制造成背景染色淺。由M蛋白所導(dǎo)致的一組疾病如：多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、重鏈病、游離輕鏈病、半分子病、良性單株丙球血癥和雙M蛋白血癥等，目前這類(lèi)疾病已不屬罕見(jiàn)。血清蛋白電泳對(duì)這類(lèi)疾病的早期診斷，療效觀察和預(yù)后判斷均有十分重要的意義。

　　二、電泳技術(shù)與免疫技術(shù)相結(jié)合，大大擴(kuò)大了其臨床應(yīng)用的范圍

　　讓電流來(lái)加速抗原與抗體的擴(kuò)散并規(guī)定其運(yùn)行方向、從而加快了沉淀反應(yīng)速度。免疫電泳技術(shù)的種子類(lèi)很多，如：對(duì)流免疫電泳（CIEP）、火箭免疫電泳（RIE）、電免疫擴(kuò)散（EID）。在種免疫電泳方法牟基礎(chǔ)上，又不斷地派生出一些新的技術(shù)，如：免疫電泳（IEP）技術(shù)，1969年Alper與Johnson推薦免疫固定電泳（IFE）是一種包括瓊脂糖凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個(gè)過(guò)程的操作，是免疫沉淀反應(yīng)的一種混合技術(shù)，檢測(cè)標(biāo)本可以是血清、尿、腦脊液或其他體液。1976年血清免疫固定電泳（IF）技術(shù)再次被推薦，用于M蛋白的分型。血清蛋白質(zhì)在瓊脂糖凝介質(zhì)上經(jīng)電泳分離后，應(yīng)用固定劑和各型免疫球蛋白及輕鏈抗血清，加于凝膠表面的泳道上，經(jīng)孵育讓固定劑和抗血清的在凝膠內(nèi)滲透并擴(kuò)散后，若有對(duì)應(yīng)的原存在，則在適當(dāng)位置形成抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)染色后蛋白質(zhì)電泳參考泳道和抗原抗體沉淀區(qū)帶被氨基黑著色，根據(jù)電泳移動(dòng)距離分離出單克隆組分，可對(duì)各類(lèi)免疫球蛋白及其輕鏈進(jìn)行分型。該技術(shù)的最大優(yōu)勢(shì)是敏感性達(dá)50-150mg/dl，操作周期短，僅需數(shù)小時(shí)，分辨率高，結(jié)果易于分析。現(xiàn)最常用于M蛋白的分型與鑒定，已列入臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)工作。

　　三、電泳技術(shù)進(jìn)行同工酶譜分析，提高診斷率

　　1、血清乳酸脫氫酶同工酶（iso-LDH）：測(cè)定LDH同工酶有電泳法、離子交換柱層析法、免疫法、抑制劑法和酶切法，但迄今用得取多的仍是瓊脂糖凝膠電泳法。經(jīng)電泳分離后要分離出五種同工酶區(qū)帶，急性必肌梗塞發(fā)病后平均6hLDH1即開(kāi)始升高，LDH1/LDH2≥1為心肌損傷的陽(yáng)性決定性水平，肝癌時(shí)可見(jiàn)LDH5明顯升高，各區(qū)帶含量的確定，將經(jīng)電泳分離后的同工酶譜采用掃描予以定量，其精確度明顯高于用肉眼判斷。

　　2、血清肌酸激酶同工酶（ISO-CK）；測(cè)定CK和CH-MB仍是目前用于證實(shí)急性心肌梗塞的道選指標(biāo)。近年來(lái)國(guó)內(nèi)一些單位用免疫抑制法測(cè)CK=MB，其原理為抗M亞單位的酶活性，因?yàn)檎Ｑ逯袔缀鯚o(wú)CK=BB，故將此值乘以2可以認(rèn)為大致代表CK-MB的活性。此法簡(jiǎn)單迅速，缺點(diǎn)是特異性差，如患者血清中存在CK-BB或者異常CK時(shí)，都將出現(xiàn)假性增高。不少作者報(bào)道異常CD-同工酶，一條稱巨CK（Maxro-CK），它是CK-BB與免疫球蛋白的復(fù)合物，有IgG亦有IgA，在正常血清中Marco-CK僅占0.8%-1.6%.另一條稱線粒體CK（CK-MT），CK-MT是結(jié)合在肌肉、腦、肝內(nèi)的線粒體表面，可能是線粒體膜的碎片，在正常血清中CK-MT是不出現(xiàn)的，在心梗時(shí)亦不出現(xiàn)，只有當(dāng)組織極度損傷，由于線粒體和細(xì)胞壁極度破壞，方可在血清中檢出。由于Macro-CK和不典型的CK-MT均不能被M抗體所抑制，故當(dāng)它們出現(xiàn)時(shí)，會(huì)導(dǎo)致CK-MB高于CK總活力的假性升高。使用電泳方法分離CK-MB，是根據(jù)CK-同工酶分子結(jié)構(gòu)不同，醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理在電泳緩沖液中，所帶電荷各異，可以從陰極到陽(yáng)極將CK不同組份予以分離，其分別為CK-MM，CK-MB和CK-BB.電泳特點(diǎn)是當(dāng)出現(xiàn)異常2同工酶如巨CKⅠ、巨CKⅡ等，從電泳圖譜上很容易發(fā)現(xiàn)，由掃描儀對(duì)各條酶進(jìn)行掃描，報(bào)告各條區(qū)帶所占百分比，結(jié)合總酶活力，求得區(qū)帶的酶省略定值結(jié)果。Macro-CK在CK-MM和CK-MB中間，而CK-MT位置靠近陰極端，在CK-MM后面。這樣不會(huì)將CK-BB和各種異常同工酶誤認(rèn)為是CK-MB而誤診，也可解決CK-MB假性增高的錯(cuò)誤原因所在。為此，CK同工酶電泳是項(xiàng)非常實(shí)用的檢驗(yàn)技術(shù)，具有十分重要的臨床意義。

　　3、CK亞型同工酶：此外，CK-MB和CK-MM亞型測(cè)定常采用瓊脂糖凝膠等電聚焦電泳或高壓電泳，由于操作比一般電泳麻煩，故常規(guī)常測(cè)定尚無(wú)法普及。目前引進(jìn)的自動(dòng)電泳儀，有試劑盒提供，可作CK亞型分析，參考值：CK-MM1（57.7±4.7）%；CK-MM2為（26.5±5.3）；CK-MM3為（15.8±2.5）%；CK-MM3/CK-MM1比值為0.28±0.05（范圍0.15-0.39），陽(yáng)性決定性水平>0.5.AMI第一天血中以MM3為主，但第二天以后則以MM1為主。采用電泳法分離CKMB，CKMB1和CKMB2在正常人血中CK-MB2極微，一般比值近似是而非，在急性心肌梗塞后4-6hCKMB2亞型即在血循環(huán)中可被檢測(cè)到，故MB2/MB1的比例明顯升高，并早于總CK-MB片段的增高。當(dāng)心肌梗塞緩解后此比便也逐漸下降。也可用于溶栓治療后的病情觀察。

　　四、結(jié)合酶免疫標(biāo)記抗體技術(shù)，檢測(cè)腦脊液內(nèi)寡克隆區(qū)帶

　　曾有作者報(bào)道采用二維電泳和銀染進(jìn)行CSF蛋白質(zhì)的分離與鑒定，方法繁復(fù)，耗時(shí)，現(xiàn)采用高分辨率瓊脂糖凝膠電泳分離CSF中的蛋白質(zhì)，并經(jīng)抗原和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的特異性IgG抗體進(jìn)行反應(yīng)來(lái)鑒定“寡克隆區(qū)帶”（OCB），經(jīng)此酶免疫標(biāo)記放大技術(shù)和顯色步驟，蛋白質(zhì)濃度達(dá)31-125ul/L即可予以檢測(cè)，可使檢測(cè)靈敏度提高了100倍，這樣腦脊液無(wú)須濃縮，避免了在濃縮過(guò)程中蛋白質(zhì)的丟失。可用于證實(shí)和分辨OCB免疫球蛋白及其型別。若在腦脊液標(biāo)本中檢出OCB，而其相應(yīng)標(biāo)本中未能檢出區(qū)帶，則為陽(yáng)性，真實(shí)地反映是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)本身合成的免疫球蛋白，具有重要臨床意義。它是一種定性檢測(cè)，在多發(fā)性硬化癥時(shí)，OCB是一個(gè)十分重要的標(biāo)志物。但須將患者血清和CSF在同一天同步進(jìn)行分析，以認(rèn)證不同來(lái)源的免疫球蛋白。中樞合成免疫球蛋白是中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患的一個(gè)重要信號(hào)，主要用于診斷的鑒別診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患如：多發(fā)性硬化癥、癡呆、脊髓炎、付腫瘤性腦炎、神經(jīng)性梅素等。

　　五、利用固相內(nèi)抗原、抗體反應(yīng)分離脂蛋白（a），用于心、腦知管獨(dú)立的危險(xiǎn)因子的檢測(cè)

　　該技術(shù)是利用抗原、抗體反應(yīng)將電泳分離的脂蛋白予以鑒別。血清經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，再經(jīng)染色后可出現(xiàn)不同脂蛋白的條帶。由于凝膠中脂蛋白等電點(diǎn)不同，不僅可區(qū)分a、前β和β區(qū)帶，又因介質(zhì)中含有抗脂蛋白（a）【LP（a）】抗體及陽(yáng)離子存在，抗LP（a）與患者血清中LP（a）結(jié)合形成復(fù)合物，陽(yáng)離子則抑制其他脂蛋白的泳動(dòng)速度，LP（a）便與其他脂蛋白分離開(kāi)來(lái)，使分辨十分清晰的LP（a）條帶呈現(xiàn)在前β與γ區(qū)域之間，將陽(yáng)性條帶掃描后，可獲得區(qū)帶的面積及其百分含量，該方法使電泳技術(shù)趨于完美，大大減少了手工操作的弊端，既可予以半定量，又能將膠片保存，便于比較。提高對(duì)心、腦血管獨(dú)立的危險(xiǎn)因子——LP（a）檢測(cè)的敏感性和特異性。

　　六、按分子量大小進(jìn)行非濃縮尿蛋白電泳，區(qū)分尿蛋白類(lèi)型

　　尿蛋白電泳可將尿液中各種蛋白質(zhì)分離用于區(qū)分尿蛋白類(lèi)型，可在無(wú)操作的情況下，協(xié)助臨床判斷腎臟損傷的部位。國(guó)內(nèi)部分實(shí)驗(yàn)室采用SDS-PAGE盤(pán)狀電泳進(jìn)行尿蛋白分離，該法具有局限性，耗時(shí)，操作繁瑣，標(biāo)本要求高，尿液需預(yù)濃縮，不適于臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛開(kāi)展。SDS=AGE電泳不需預(yù)濃縮，尿蛋白電泳后呈現(xiàn)出中、高分子量蛋白區(qū)，帶主要反應(yīng)腎小球病變；呈現(xiàn)出低分子量蛋白區(qū)帶，可見(jiàn)于腎小管病變及溢出性蛋白尿；混合性蛋白尿則可見(jiàn)到大、中、小各種分子量區(qū)帶，示腎小球及腎小管均受累及。掃描儀可對(duì)電泳后尿液中蛋白質(zhì)剖象進(jìn)行掃描，求出百分比，以顯示腎小球或腎小管損傷程度，其電泳圖譜及掃描圖形可作國(guó)資料永載，利于分析比較。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理該技術(shù)的最大進(jìn)步是尿液不需預(yù)濃縮，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果清晰，僅需三小時(shí)即可完成試驗(yàn)，還備有完整的定性標(biāo)準(zhǔn)，易于量化，便于分析，對(duì)腎臟疾的診斷，鑒別診斷，指導(dǎo)治療和判斷愈合頗有價(jià)值。

　　近期發(fā)展起來(lái)的毛細(xì)管電泳是一種新型的區(qū)帶電泳，又稱毛細(xì)管帶電泳。它是在毛細(xì)管中裝入緩沖液，在其一端注入樣品，在毛細(xì)管兩端加直流高電壓實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分離，他離后的樣品依次通過(guò)設(shè)在毛細(xì)管一端的檢測(cè)器檢出。毛細(xì)管電泳在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用也十分廣泛，從所檢測(cè)樣品的來(lái)源看可分為尿樣、血漿、血清、腦脊液、紅細(xì)胞、其他體液或組織，以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物活體等。從分離對(duì)象看包括蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、糖、酶、DNA、寡核苷酸、病毒、小和生物活性分子、離子、藥物及其代謝產(chǎn)物等。根據(jù)用途可分為臨床疾病診斷、臨床蛋白質(zhì)分析、臨床藥物分析、代謝研究、病理研究、同工酶分析、PCR產(chǎn)物分析、DNA片段及序列分析等。由于它具有無(wú)法比擬的高效和快速性，因而受到越來(lái)越多科學(xué)家們的重視。

　　中國(guó)的電泳技術(shù)起步不算太晚，但由于種種原因，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室仍采用較落后的電泳設(shè)備。隨著國(guó)際、國(guó)內(nèi)科技發(fā)展的日新月異和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的突飛猛進(jìn)，電泳技術(shù)也在不斷發(fā)展和更新，其在臨床醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域中有著極其廣泛的應(yīng)用價(jià)值，相信隨著該技術(shù)的不斷發(fā)展必將越來(lái)越受到同道們的青睞。