剛地弓形蟲的病原學(xué)檢查與血清學(xué)試驗
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病原學(xué)檢查
1、涂片染色法
取急性期患者的體液(腦脊液、血液、骨髓、羊水、胸水)經(jīng)離心后,沉淀物做涂片,或采用活組織穿刺物涂片,染色后,鏡檢弓形蟲滋養(yǎng)體。此法簡便,但陽性率不高,易漏檢。此外,也可切片用免疫酶或熒光染色法,觀察特異性反應(yīng),可提高蟲體的檢出率。
2、動物接種分離法或細胞培養(yǎng)法
采用敏感的實驗動物小白鼠,樣本接種于腹腔內(nèi),1周后剖殺取腹腔液鏡檢,陰性需盲目傳代至少3次,樣本亦可接種于離體培養(yǎng)的單層有核細胞,動物接種和細胞培養(yǎng)是目前常用的病原查診方法。
血清學(xué)試驗
鑒于弓形蟲病原學(xué)檢查的不足和血清學(xué)技術(shù)的進展,血清學(xué)診斷已成為當(dāng)今廣泛應(yīng)用的診斷手段,方法種類較多。
1、染色試驗(dye test, DT)
為經(jīng)典的特異血清學(xué)方法,采用活滋養(yǎng)體在有致活因子的參與下與樣本內(nèi)特異性抗體作用,使蟲體表膜破壞不為著色劑亞甲藍所染。鏡檢見蟲體不被藍染者為陽性,蟲體多數(shù)被藍染者為陰性。
2、間接血凝試驗(IHA)
此法特異、 靈敏、簡易,適用于流行病學(xué)調(diào)查及篩查性抗體檢測,應(yīng)用廣泛。
3、間接免疫熒光試驗(IFA)
以整蟲為抗原,采用熒光標記的二抗檢測特異抗體。此法可測同型及亞型抗體,其中測IgM適用于臨床早期診斷。
4、酶聯(lián)免疫吸附試驗( ELlSA)
用于檢測宿主的特異性循環(huán)抗體或抗原,已有多種改良法廣泛用于早期急性感染和先天性弓形蟲病的診查。
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