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分析放射免疫常用的方法有哪些?
放射免疫分析法(radioimmunoassay RIA)應(yīng)用競爭性結(jié)合的原理,應(yīng)作放射性同素標記抗原(或抗體)與相應(yīng)抗體(或抗原)結(jié)合,通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果,本方法可進行超微量分析,敏感性高,可用于測定抗原、抗體、抗原抗體復合物。本法常用的同位素有125Ⅰ和131Ⅰ。
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種:
(1)液相法:將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合,經(jīng)一定作用時間后,分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原,測定這兩部分的放射活性,計算結(jié)合率。醫(yī)學/教育網(wǎng)搜集整理在反應(yīng)系統(tǒng)中,待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰(zhàn) 性與胰島素抗體結(jié)合。非標記的抗原越多,標記抗原與抗體形成的復合物越少。非標記抗原含量與標記抗原抗體復合物的量呈一定的函數(shù)關(guān)系。預先用標準的非標記抗原作成標準曲線后,即可查出待檢標本中胰島素的含量
(2)固相法:將抗原或抗體吸附到固相載體表面,然后加待檢標本,最后加標記抗體。測定固相載體的放射活性,常用的固相載體有溴化氰(CNBr)海豹化的紙片或聚苯乙烯小管。
放射免疫分析法應(yīng)用范圍廣泛,包括多種激素(胰島素、生長激素、甲狀腺素等)維生素、藥物、IgE等。
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