1.紅細胞數(shù)和紅細胞比積迄今,絕大多數(shù)血液分析儀使用電阻抗法進行紅細胞計數(shù)和紅細胞比積測定,其原理同白細胞一樣。紅細胞通過小孔時,形成的相應(yīng)的脈沖的多少即紅細胞的數(shù)目,脈沖的高度代表單個脈沖細胞的體積。脈沖高度疊加經(jīng)換算即可得到紅細胞的比積(有的儀器先以單個細胞高度計算平均紅細胞容積(MCV),再乘以紅細胞的數(shù)得出紅細胞比積。)稀釋的血液進入紅細胞檢測通道時,其中含有白細胞,因此,紅細胞檢測的各項參數(shù)均含有白細胞因素,但正常血液有形成分中白細胞比例很少,故其影響可忽略不計,要某種病理情況下,如白血病,白細胞數(shù)明顯增加而又伴嚴重貧血時,即可使所得務(wù)項參數(shù)產(chǎn)生明顯誤差。根據(jù)所測單個紅細胞體積及相同體積細胞占總體的比例,醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理可打印出紅細胞體積分布直方圖。
2.血紅蛋白測定:任何類型、檔次的血細胞分析儀,血紅蛋白測定原理是相同的。被稀釋的血液的加入溶血劑后,紅細胞溶解,釋放血紅蛋白,后者與溶血劑結(jié)合形成血紅蛋白衍生物,進入血紅蛋白測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530-550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成比例,儀器便可顯示Hb濃度。不同系列血液分析儀配套溶血劑配方不同,形成的血紅蛋白衍生物亦不同,吸光度各異但最大吸收峰均接近540nm .這是因為ICSH推薦的氰化高鐵法,HICN最大吸收峰在540nm.校正儀器必須以HICN值為標準。大多數(shù)系列血液分析儀溶血劑內(nèi)均含有氰化鉀,與血紅蛋白作用后形成氰化血紅蛋白(注意不是氰化高鐵血紅蛋白),其特點是顯色穩(wěn)定,最大吸收峰接近540nm,但吸收光譜與HICN有明顯的不同。此點在儀器校正時應(yīng)十分注意。
為了減少溶血劑的毒性,避免含氰化的血紅蛋白衍生物檢測后的污物處理,近年來,有些血液分析儀使用非氰化溶血劑(如SLS-HB)實驗證明,形成的衍生物與HICN吸收光譜相似,實驗結(jié)果的精確性、準確性達到含有氰化物溶血劑同樣水平。既保證了實驗質(zhì)量又避錫了試劑對分析人員的毒性和環(huán)境污染。
3.各項紅細胞指數(shù)檢測原理:同一手工法一樣,MCV、平均紅細胞血紅蛋白量(MCH)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞體積分布寬度(RDW)均是根據(jù)儀器檢測,的紅細胞數(shù)、紅細胞比積和血紅蛋白量的實驗數(shù)據(jù),經(jīng)內(nèi)存電腦換算出來的。
RDW由血液分析儀器測量后獲得,是反映外周血紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù)。簡言之,是反映紅細胞大小不等的客觀指標。多數(shù)儀器用所測紅細胞體積大小的變異系數(shù)來表示,即RDW-CV,也有的儀器采用RDW-SD報告方式。
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