由于細菌產(chǎn)生的酶系不同，因而對底物的分解能力不同，其代謝產(chǎn)物也不同。用生物化學方法測定這些代謝產(chǎn)物，可用來鑒定細菌，這種生化反應(yīng)測定方法也稱生化試驗醫(yī)`學教育網(wǎng)搜集整理。

細菌的生化試驗是將已分離純化的待檢細菌，接種到一系列含有特殊物質(zhì)和指示劑的鑒別培養(yǎng)基中，觀察該菌在這些培養(yǎng)基內(nèi)的pH變化，或是否產(chǎn)生某種特殊的代謝產(chǎn)物，現(xiàn)代細菌學已普遍采用微量、快速、自動化等鑒定系統(tǒng)，已有很多相應(yīng)的配套試劑供種屬鑒定使用，常見的生化試驗有：

1.糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗：各種細菌分解糖（醇、苷）的能力不同，分解后代謝產(chǎn)物不同，可根據(jù)其分解產(chǎn)物鑒別細菌。實際應(yīng)用中，可選擇合適的含有單糖、雙糖、三糖或多糖的培養(yǎng)基，接種待檢菌，經(jīng)培養(yǎng)后觀察結(jié)果。若能分解糖類產(chǎn)酸，培養(yǎng)基中的指示劑呈酸性反應(yīng)；產(chǎn)氣的細菌則出現(xiàn)氣泡或裂隙。如大腸桿菌能分解乳糖，傷寒桿菌與痢疾桿菌則不能，用此可加以區(qū)別。糖發(fā)酵試驗是鑒定細菌最常用的生化反應(yīng)，特別用于腸桿菌科細菌的鑒定。

2.甲基紅試驗：細菌分解葡萄糖形成丙酮酸，丙酮酸進一步分解成甲酸、乙酸、乳酸等混合酸，使培養(yǎng)基pH下降至4.4以下，加入甲基紅指示劑變?yōu)榧t色。若產(chǎn)酸量少或?qū)⑺徇M一步分解為醇、酮、醛等，使培養(yǎng)基pH在5.4以上，甲基紅試驗則呈橘黃色。該試驗簡稱為MR試驗。將待檢菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基內(nèi)，培養(yǎng)后滴加甲基紅試劑，呈紅色為MR試驗陽性，橘紅色為弱陽性，橘黃色為陰性。該試驗主要用于大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別，前者陽性，后者陰性。

3.VP試驗：有些細菌能使丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，進而在堿性溶液中被空氣中的氧氧化成雙乙酰，雙乙酰在α-萘酚和肌酸的催化下，生成紅色化合物，為VP試驗陽性。將待檢菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基，培養(yǎng)后按每毫升培養(yǎng)基加入含0.3%肌酸或肌酐的0.1ml40%KOH溶液，48～50℃水浴2h或37℃4h，充分搖動后觀察結(jié)果，紅色為VP試驗陽性。

4.吲哚試驗：有些細菌含有色氨酸酶，分解培養(yǎng)基中的色氨酸產(chǎn)生吲哚，吲哚與對二甲基氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈紅色。該試驗也稱靛基質(zhì)試驗。將待檢菌接種于蛋白胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后沿管壁加入對二甲基氨基苯甲醛試劑0.5ml，使其形成兩層液面，兩液面接觸處呈紅色為陽性，無色為陰性。該試驗主要用于腸道桿菌的鑒定。

5.硫化氫試驗：有些細菌分解含硫氨基酸生成硫化氫，遇培養(yǎng)基中的醋酸鉛或硫酸亞鐵可形成黑色的硫化鉛或硫化亞鐵沉淀。將待檢菌接種于醋酸鉛培養(yǎng)基中培養(yǎng)，有黑色沉淀者為陽性，無變化者為陰性。H2S試驗常用于腸桿菌科菌屬間的鑒定。