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凝集反應(yīng)-檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)資料

2016-07-18 09:34 來源:
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凝集反應(yīng)是臨床檢驗(yàn)技師考試中可能涉及的知識點(diǎn),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了相關(guān)知識,以便大家及時(shí)掌握!

凝集反應(yīng)

1、凝集反應(yīng)的原理及特點(diǎn);

定義:細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒性載體與相應(yīng)抗體結(jié)合后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。

概念:顆粒性抗原+相應(yīng)抗體↓(適量電解質(zhì))凝集現(xiàn)象,可溶性抗原(或抗體)+載體顆粒↓ 致敏顆粒+相應(yīng)抗體(或抗原)↓(適量電解質(zhì))凝集現(xiàn)象。

特點(diǎn):1.抗原為顆粒性抗原或可溶性抗原致敏顆粒;2.反應(yīng)時(shí)間較短,需幾到十幾分鐘;3.反應(yīng)產(chǎn)物為凝集塊;4.凝集反應(yīng)抗原分子大,反應(yīng)面積小,為使抗體分子不致過多,試驗(yàn)時(shí)需稀釋抗體。

2 、常見的直接凝集反應(yīng):

直接凝集試驗(yàn):顆粒性抗原在有電解質(zhì)的參與下,直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。

凝集原(agglutinogen):凝集反應(yīng)中的抗原

凝集素(agglutinin):凝集參與反應(yīng)的抗體

分類:玻片凝集實(shí)驗(yàn)(將已知抗體與待測顆??乖苯拥蛢r(jià)在玻片上,混勻并在室溫下反應(yīng)數(shù)分鐘,用肉眼或低倍鏡觀察有無凝集現(xiàn)象,出現(xiàn)顆粒凝集的為陽性反應(yīng)。方法評價(jià):簡便、快速;定性檢測方法;但敏感性較低。臨床應(yīng)用:主要用于菌種鑒定和血清學(xué)分型,也可檢測病人血清中有無相應(yīng)的抗體;用于人類ABO血型鑒定。),試管凝集實(shí)驗(yàn)(顆粒性抗原(如細(xì)菌或紅細(xì)胞等)與相應(yīng)抗體在試管中直接結(jié)合,在一定條件下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。方法評價(jià):經(jīng)典的半定量試驗(yàn);敏感性不高;干擾因素多,影響特異性;操作較簡單。臨床應(yīng)用:用已知抗原測定血清中有無相應(yīng)抗體及其含量,輔助臨床診斷疾病或流行病學(xué)調(diào)查。如外斐試驗(yàn)、肥達(dá)試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)。)

3 、間接凝集反應(yīng)的分類及常見試驗(yàn)。

間接凝集試驗(yàn):將可溶性抗原(或抗體)吸附或偶聯(lián)于載體上,使之成為致敏載體顆粒,再與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在適宜電解質(zhì)的參與下,出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。

載體(carrier):試驗(yàn)體系中與免疫無關(guān)的顆粒。

致敏:抗原(或抗體)偶聯(lián)于顆粒表面的過程。

致敏顆粒(sensitized particle): 吸附有已知抗原或抗體的顆粒。

(正向間接凝集反應(yīng):用抗原致敏載體,檢測標(biāo)本中有無相應(yīng)抗體。先將可溶性抗原結(jié)合與載體顆粒,然后與待測標(biāo)本中的抗體反應(yīng),出現(xiàn)肉眼可見凝集顆?;驂K。反向簡潔凝集反應(yīng):用特異性抗體致敏載體,檢測標(biāo)本中有無相應(yīng)抗原。簡潔凝集抑制反應(yīng):用抗原致敏載體,聯(lián)合相應(yīng)抗體檢測標(biāo)本中是否存在于致敏抗原相同的抗原。

協(xié)同凝集反應(yīng):金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁中含有A蛋白(staphylococcus protein A,SPA),SPA具有與IgG的Fc段結(jié)合的特性,利用該特性與IgG抗體相連制成抗體致敏的顆粒載體,當(dāng)它與相應(yīng)抗原反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象即叫協(xié)同凝集試驗(yàn)。

類風(fēng)濕因子檢測:

原理::類風(fēng)濕因子( rheumatoid factor RF)是由于細(xì)菌、病毒等感染因子,引起體內(nèi)產(chǎn)生的以變性IgG(一種抗體)為抗原的一種自身抗體。IgM型為主要類型。

IgG吸附于聚苯乙烯膠乳顆粒上作為檢測試劑,在反應(yīng)介質(zhì)中,待檢血清中如含有RF,可與膠乳顆粒出現(xiàn)凝集反應(yīng)。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理

操作步驟::在3塊載玻片上分別加一滴RF陽性血清、RF陰性血清及待檢血清;加一滴IgG致敏的膠乳于各血清樣品中,輕微晃動載玻片混勻。1min 后觀察凝集反應(yīng)發(fā)生情況。

注意事項(xiàng):器材要潔凈、血清要新鮮、以確保結(jié)果可靠。注意陰性、陽性對照的設(shè)立。注意血清及致敏膠乳加樣量的比例。

紅細(xì)胞為載體:間接血凝試驗(yàn)(可溶性抗原吸附于人O型紅細(xì)胞或綿羊、家兔紅細(xì)胞上,制備成抗原致敏的紅細(xì)胞,然后與相應(yīng)抗體作用,在有電解質(zhì)存在的條件下,作用一定時(shí)間后可出現(xiàn)肉眼可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。方法評價(jià):敏感性高于直接凝集試驗(yàn)和膠乳凝集試驗(yàn);操作簡便易行、快速、成本低廉。)

聚苯乙烯膠乳微粒為載體:膠乳凝集試驗(yàn)

間接凝集反應(yīng)特點(diǎn):敏感、快速、操作簡便、不需特殊儀器;檢測范圍廣(各種抗體和可溶性抗原)。敏感性比直接凝集反應(yīng)高。

間接凝集反應(yīng)應(yīng)用:抗原的檢測:抗體的檢測:感染性疾病、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病。

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