雙向擴(kuò)散試驗(yàn)是什么呢
雙向擴(kuò)散試驗(yàn)是什么呢?快來跟著小編了解一下吧!
讓抗原和抗體在瓊脂中各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散,在比例恰當(dāng)之處形成沉淀線,可對抗原或抗體進(jìn)行定性分析。
雙向擴(kuò)散試驗(yàn)靈敏度低,出現(xiàn)結(jié)果慢,不能精確定量。根據(jù)試驗(yàn)形式可分為試管法和平板法兩種。
(一)試管法 抗體——瓊脂——抗原
(二)平板法 是鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一。
1.抗原或抗體的存在與否以及相對含量的估計(jì)
(1)沉淀線靠近抗原孔,則抗體含量較大;
(2)沉淀線靠近抗體孔,則抗原含量較大;
(3)不出現(xiàn)沉淀線則無對應(yīng)的抗體(抗原)或者抗原過量。
2.抗原或抗體相對分子量的分析
(1)分子量小者擴(kuò)散快,反之則較慢。
(2)由于慢者擴(kuò)散圈小,局部濃度則較大,形成的沉淀線彎向分子量大的一方;如果兩者分子量大致相等,則形成直線。
3.抗原性質(zhì)的分析
(1)兩條沉淀線互相吻合相連,表明抗體與兩個抗原中的相同表位結(jié)合而沉淀,兩個抗原相同;
(2)沉淀線呈部分相切,說明兩個抗原之間有部分相同;
(3)兩條沉淀線交叉而過,說明兩個抗原完全不同。
4.抗體效價的滴定
固定抗原的濃度,稀釋抗體;或者抗原和抗體雙方皆作不同的稀釋,經(jīng)過自由擴(kuò)散,形成沉淀線,以出現(xiàn)沉淀線最高的抗體稀釋度為該抗體的效價。
5.抗原或抗體純度鑒定 用混合抗原或抗體鑒定抗體或抗原,出現(xiàn)一條沉淀線說明待測抗原或抗體純,出現(xiàn)多條沉淀線說明不純。
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