流行性乙型腦炎病毒的微生物學(xué)診斷

2020-11-30 17:43 來(lái)源：醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)

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乙腦早期快速診斷通常采集性期患者血清或腦脊液特異性lgM ，也可做RT—PCR檢測(cè)標(biāo)本中的病毒核酸片段，一般6個(gè)小時(shí)內(nèi)可初步報(bào)告結(jié)果。常規(guī)血清學(xué)試驗(yàn)，（H1、CF、NT）需取雙份血清，同時(shí)做對(duì)比試驗(yàn)，當(dāng)恢復(fù)期血清抗體滴度比急性期≥ 4倍時(shí)，有輔助診斷意義，可用于臨床回顧性診斷。由于乙腦患者病毒血癥期短，直接檢出病毒抗原或分離病毒陽(yáng)性率低，較少用于診斷試驗(yàn)。

特異性lgM檢測(cè)：

乙腦病毒感染發(fā)病早期即產(chǎn)生特異性lgM，病后2～3周達(dá)到高峰，故單份血清可做出早期診斷。可使用：

①lgM 捕捉ELISA法。

②2ME—NI法，血凝抑制抗體存在于lgM及l(fā)gG中，將早期單份血清分成二份，一份用2巰基乙醇（2ME）處理，以破壞lgM，另一份不處理，然后同時(shí)做HI試驗(yàn)，若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍，則為lgM 陽(yáng)性。

③微量間接免疫熒光法，用熒光素標(biāo)記的抗u鏈血清，檢測(cè)已與細(xì)胞抗原片結(jié)合的lgM，根據(jù)特異性熒光顆粒，判斷血清標(biāo)本中的lgM存在。

常規(guī)血清學(xué)試驗(yàn)：

1.血凝抑制試驗(yàn) 對(duì)乙腦診斷而言，本法特異性較低，但敏感性高，簡(jiǎn)便易行。常用于病毒的初步鑒定，確定有無(wú)乙腦病毒存在。檢測(cè)血清標(biāo)本中的HI抗體，多采用2ME—HI法。

2.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 補(bǔ)體結(jié)合抗體僅存在于lgG 中，病后出現(xiàn)遲，消失快，適用于診斷感染。

3.中和試驗(yàn) 抗體存在于lgG、 lgM中，出現(xiàn)早，維持久。中和試驗(yàn)特異性和敏感性都高，但操作繁雜，需用大量動(dòng)物或組織培養(yǎng)管，需時(shí)較久，不適于臨床診斷常規(guī)使用，而在血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查和病毒鑒定上有價(jià)值。

病毒分離與鑒定：

取病尸腦組織研磨成10%懸液，接種1-3日齡乳鼠腦內(nèi)，待發(fā)病頻死時(shí)，取腦懸液，用單克隆抗體做中和試驗(yàn)鑒定病毒。也可接種敏感細(xì)胞（如C6/36細(xì)胞系）分離病毒。

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