只要堅(jiān)持、努力，勝利就會(huì)屬于你！“抗核抗體”是檢驗(yàn)職稱考試需要掌握的知識(shí)，那“抗核抗體的檢測(cè)方法”有哪些呢？以下是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理的相關(guān)知識(shí)，希望有助于大家備考！祝大家考試順利，取得好成績(jī)！

由于抗核抗體（ANA）的復(fù)雜性及多樣性，故測(cè)定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫熒光法、放射免疫法、ELISA、免疫雙擴(kuò)散、對(duì)流免疫電泳及免疫印跡技術(shù)等。

常用間接免疫熒光法（indirect immunofluorescence，IIF）作為總的ANA篩選試驗(yàn)。鼠肝常用于檢測(cè)抗核抗體，但近十年來(lái)多被HEp-2細(xì)胞所代替，這是因?yàn)镠Ep-2細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：

人源性；

細(xì)胞核大；

分裂期細(xì)胞多；

可大批量培養(yǎng)。

當(dāng)然，單個(gè)細(xì)胞不可能替代組織切片，所以鼠組織切片仍繼續(xù)用于自身抗體的檢測(cè)。

ELISA法：

臨床上主要是應(yīng)用間接ELISA檢測(cè)抗dsDNA抗體，其重復(fù)性及敏感性均較對(duì)流免疫電泳及雙擴(kuò)散為高。目前已有試劑盒供應(yīng)。

放射免疫法：

常用于檢測(cè)抗DNA抗體，有Farr法及過(guò)濾法。

（1）Farr法的原理為用同位素標(biāo)記DNA，被標(biāo)記的DNA和被檢血清的抗DNA抗體結(jié)合，經(jīng)50%硫酸銨飽和液沉淀，然后比較沉淀物和上清液中的放射活性，從而得出DNA結(jié)合活性，一般結(jié)合率大于20%為陽(yáng)性。

（2）過(guò)濾法是在分離結(jié)合物時(shí)用纖維素酯薄膜濾器（孔徑為0.45μm）進(jìn)行過(guò)濾，游離的DNA被濾去而與抗體結(jié)合的復(fù)合物被阻留在濾膜上。

免疫印跡（immunoblotting）法：

先將混合抗原作凝膠電泳，分離開不同的區(qū)帶，然后將這些帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上，最后用酶標(biāo)抗體或放射性同位素標(biāo)記抗體進(jìn)行檢測(cè)和分析。

由于該試驗(yàn)不需純化的單個(gè)抗原，可在同一固相上作多項(xiàng)分析檢測(cè)，靈敏度高，特異性強(qiáng)。故目前已廣泛用于自身免疫病患者血清中多種自身抗體的檢測(cè)，如檢測(cè)抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SS-A抗體及SS-B抗體等。

另外，還可用傳統(tǒng)的瓊脂雙向擴(kuò)散法、醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理對(duì)流免疫電泳法、間接血凝法和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等。這些試驗(yàn)要求的實(shí)驗(yàn)條件比較低，但敏感性也比較低。

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